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温州医科大学学报
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2015年 45卷 11期
刊出日期:2015-11-25
论著
临床经验
高教研究
技术与方法
个案报告
综述
论著
781
耐百草枯人肺腺癌细胞株的建立及其生物学特性
洪广亮,谭佳平,丁颖威,赵光举,李萌芳,卢中秋
目的:建立耐百草枯(PQ)的人肺腺癌细胞株(A549/PQ),并初步研究其生物学特性。方法:采用浓度递增诱导法建立A549/PQ,光镜观察细胞形态变化,以乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测法、CCK-8法检测A549/PQ和亲本A549对PQ的敏感性,计算A549/PQ的半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI),细胞计数法绘制细胞生长曲线和倍增时间,流式细胞技术分析细胞周期。结果:光镜下A549/PQ细胞变大、形态不规则、细胞间隙变大。PQ诱导A549/PQ细胞LDH释放明显低于其亲本细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。PQ诱导A549/PQ细胞IC50为1716.33 μmol/L明显高于A549细胞的215.03 μmol/L(P<0.05),RI为7.98。A549/PQ细胞倍增时间明显高于A549细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。A549/PQ细胞G0/G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P<0.05)。结论:成功构建对PQ耐药的A549细胞,其生物学特征与亲本细胞存在明显差异,为PQ毒理机制研究提供了良好细胞模型。
2015 Vol. 45 (11): 781- [
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785
HoxB8对结直肠癌细胞生长迁移的影响
林飞燕1,吴爱华1,张培丽1,蒋磊1,李绍堂2
目的:通过构建过表达HoxB8基因的慢病毒表达载体,研究HoxB8基因对结直肠癌细胞生长迁移的影响。方法:采用PCR技术扩增出人HoxB8基因全长,通过限制性内切酶EcoR I和SAC II双酶切,T4 DNA连接酶连接,克隆至慢病毒载体,构建Lenti-HoxB8-GFP重组载体。重组阳性克隆进行PCR和酶切鉴定,测序验证序列正确。将重组载体质粒以及3个辅助质粒共转染人肾上皮细胞(293T)进行慢病毒包装,收集病毒颗粒。然后将病毒颗粒感染结直肠癌细胞RKO,并将RKO细胞分为转染组(转染慢病毒重组质粒Lenti-HoxB8-GFP)、对照组(转染空白质粒Lenti-GFP)和空白对照组。RT-PCR和Western blot法检测病毒感染后 HoxB8在细胞中的表达情况。MTT、平板克隆形成实验和Transwell小孔试验检测过表达HoxB8基因对结直肠癌细胞生长迁移的影响。结果:经鉴定显示重组载体质粒构建成功,测序正确。293T细胞高效包装Lenti-HoxB8-GFP慢病毒,携带HoxB8基因的慢病毒感染RKO细胞后可看到大量绿色荧光,RT-PCR和Western blot法检测分别证实HoxB8基因和蛋白在转染组细胞中呈高表达。实验组细胞的增殖和平板克隆形成能力高于空白组及对照组。Transwell小孔试验结果显示HoxB8高表达能够促进结直肠癌细胞的转移。结论:成功构建HoxB8慢病毒表达载体,过表达HoxB8能够促进结直肠癌细胞的增殖、克隆形成以及迁移。
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791
氯化镉对ZR75-1细胞DNA错配修复活性的抑制效应
刘晓娟1,陈元红1,刘亚2,胡启迪2,任湘鹏2
目的:研究氯化镉(CdCl2)暴露对人乳腺癌细胞ZR75-1 DNA错配修复(DNA MMR)活性的影响。方法:用0、10、20、30、40、50 μmol/L的CdCl2对ZR75-1细胞染毒48 h和72 h后,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测各组ZR75-1细胞的存活率。以5、10、15 μmol/L的CdCl2分别作用于ZR75-1细胞48 h后,各组平行转染同源、异源质粒,通过流式细胞术检测相对荧光表达率来评估各组ZR75-1细胞的DNA MMR活性;同时利用实时荧光定量PCR技术检测CdCl2暴露后DNA MMR活性相关基因MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA的表达。结果:MTT结果显示,与对照组相比,10、20 μmol/L CdCl2对ZR75-1细胞的存活率无显著影响(P>0.05),而30、40、50 μmol/L CdCl2对细胞有显著毒性作用(P<0.05),且表现出浓度和时间依赖效应。流式细胞术检测显示,与对照组相比,5、10、15 μmol/L CdCl2暴露均显著降低了ZR75-1细胞的DNA MMR活性(P<0.05)。荧光定量PCR技术检测结果显示,5、10、15 μmol/L CdCl2处理组中MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA表达水平总体上升,变化趋势均为随CdCl2暴露浓度增加先上升后下降。结论:对细胞存活率无影响的CdCl2暴露可显著抑制ZR75-1细胞的DNA MMR活性,并上调DNA MMR活性相关基因MLH1、MSH2、MSH6、PMS1 mRNA的表达水平。
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MMPs、TIMPs及炎症因子在习惯性流产孕妇中的表达
马丹琦1,2,梁丹3,李爱金3,杨丽珠4,吕杰强1
目的:探讨习惯性流产孕妇外周血和子宫内膜中基质金属蛋白酶(MMPs)、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)与氧化应激及炎症因子表达的意义。方法:收集2012年10月至2014年10月温州医科大学附属第二医院及台州恩泽医疗中心集团妇产科收治的习惯性流产孕妇32例为观察组,早孕人工流产孕妇35例为对照组。ELISA法测定外周血和子宫内膜中MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-1及子宫内膜超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),并作相关性分析。结果:与对照组比,观察组血清MMP-2明显下降(P<0.05),MMP-9、TIMP-2明显升高(P<0.05),子宫内膜MMP-2、MMP-9明显下降(P<0.01),TIMP-2明显升高(P<0.05);观察组子宫内膜SOD明显下降(P<
0.05),MDA、IL-6、TNF-α明显升高(P<0.05);观察组子宫内膜MMP-2、MMP-9与SOD、GSH-PX呈正相关,TIMP-2与MDA、TNF-α呈正相关。结论:MMPs/TIMPs系统的失平衡及炎症应激的异常表达可能与习惯性流产相关。
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799
男性酒精依赖患者认知功能与红细胞参数的相关性分析
郑克1,2,张瑜1,陈庆健3,叶敏捷2,惠李2,潘建设2,唐闻捷1,3
目的:探讨男性酒精依赖患者是否存在认知损伤及其与红细胞参数之间的相关性。方法:采用重复性成套神经心理状态测查量表(RBANS)对60例成年男性的认知功能进行评估,其中酒精依赖患者30例,正常受试者30例,并检测红细胞参数。利用方差分析比较酒精依赖组认知功能及红细胞参数与对照组的差异,并采用pearson相关分析探索酒精依赖患者认知功能与红细胞参数间的相关性。结果:即刻记忆、视觉空间、语言功能、注意、延迟记忆和RBANS总分在酒精依赖组和对照组之间差异具有统计学意义(均P<0.01);酒精依赖组与对照组相比,红细胞计数显著降低,平均红细胞体积显著增大,差异有统计学意义(均P<0.01)。酒精依赖组红细胞计数与延迟记忆呈正相关(P<0.01);平均红细胞体积与语言功能(P<0.05)、延迟记忆(P<0.01)、RBANS总分呈负相关(P<0.05)。结论:男性酒精依赖患者存在认知损伤,并且红细胞计数和平均红细胞体积对其认知损伤具有显著影响。
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803
hNIS基因转染SW480细胞裸鼠模型的建立及核素显像
张红征1,杜凡2,周佰林3,文正伟1,李焕斌1,王玲1,张琦1
目的:观察人钠/碘转运体(hNIS)重组质粒(pcDNA3.1+-hNIS)脂质体法转染结肠癌细胞(SW480)的裸鼠模型介导放射性核素显像的可行性。方法:酶切鉴定pcDNA3.1+-hNIS,转染SW480细胞并检测hNIS基因及蛋白的表达,筛选稳定表达hNIS的SW480细胞,建立肿瘤裸鼠模型并进行放射性核素99mTcO4-显像结果:pcDNA3.1+-hNIS转染SW480细胞后成功检测到hNIS基因及蛋白的表达,结肠癌裸鼠模型成功介导放射性核素99mTcO4-显像。结论:重组质粒pcDNA3.1+-hNIS可以实现结肠癌裸鼠模型的hNIS表达,使放射性核素显像和结肠癌放射性核素治疗成为可能。
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瑞舒伐他汀钙对老年重度重叠综合征患者预后的影响
叶环,施肖红,吴厉锋,徐滨,程恒金,邵美琴
目的:探讨瑞舒伐他汀对老年重度重叠综合征(OS)患者预后的影响。方法:选取老年重度OS患者40例,根据随机数字表随机分为治疗组和对照组,每组各20例。治疗组均加用瑞舒伐他汀钙片10 mg,每日1次;而对照组无服用他汀类或影响血脂代谢的药物。分别监测入组第1天、第30天、第90天及第180天的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、脂蛋白(α)(LPα)、血清载脂蛋白A1(apoA1)、血清载脂蛋白B(apoB)、呼吸暂停低通气指数(AHI)、夜间平均血氧饱和度(M-SaO2)、夜间最低血氧饱和度(L-SaO2)、Epworth嗜睡量表评分(ESS)、PCO2、PO2、FEV1/FVC、FEV1%、180 d内COPD急性加重住院率。治疗期间,2组患者均每月监测血糖、肌酸磷酸激酶、肝肾功能,观察有无异常神经系统表现、肌痛及胃肠道异常反应。所有数据均输入SPSSl8.0软件,进行组内和组间分析。结果:第30天、第90天、第180天的apoA1、M-SaO2、L-SaO2、PO2、FEV1/FVC%、FEV1%:治疗组及对照组均较第1天明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组比对照组升高更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。LPα、apoB、TG、TC、LDL-C、AHI、ESS、PCO2:治疗组及对照组均较第1天明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组比对照组降低更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。180 d内COPD急性加重住院率治疗组少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组均未出现因血糖明显异常、肌酸磷酸激酶明显升高、肾功能不全、异常神经系统表现、异常肌痛、胃肠道异常反应而退出的情况。结论:老年重度OS患者应用瑞舒伐他汀钙片能在一定程度上纠正血脂紊乱,改善老年重度OS患者预后。
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811
超高效液相色谱法测定白酒中邻苯二甲酸酯的浓度
周璇1,王哲1,李军伟2,朱光辉1
目的:建立超高效液相色谱(UPLC)法测定白酒中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)的方法。方法:采用固相萃取柱提取白酒中的塑化剂,使用超高效液相色谱仪进行检测,流动相为乙腈-水,流速为0.40 mL/min,检测波长为224 nm。结果:本方法线性关系良好,日内、日间精密度均<15%,加标回收率为90.08%~103.32%。最低检测限为1 μg/mL。5种不同品牌白酒均含有DEHP。结论:UPLC适合于白酒中塑化剂的检测。
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814
趋化因子CXCL14在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义
周益飞1,王照亮1,张瑜1,陈琴1,郑翔2,佟笑1,3,黄益灯1,3
目的:分析趋化因子CXCL14在鼻咽癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:采集30例鼻咽癌患者(鼻咽癌组)及30例鼻咽炎患者(正常对照组)鼻咽部组织,采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法进行CXCL14表达的检测。结果:CXCL14 mRNA和蛋白水平在鼻咽癌组的表达较正常对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.001)。临床相关性分析表明,CXCL14表达的下调与肿瘤T分级(P=0.001)、淋巴结转移(P=0.028)及临床分期(P=0.001)相关。结论:鼻咽癌组织中CXCL14 mRNA和蛋白水平表达下降,CXCL14可能参与鼻咽癌的发生、发展过程。
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临床经验
819
妊娠晚期瘢痕子宫下段厚度的影响因素分析
付玉川,刘倩,黄雅楠,朱欢乐,刘锟,严志汉
目的:探讨妊娠晚期瘢痕子宫下段厚度的影响因素。方法:回顾性分析2011年6月至2013年12月于我院行磁共振成像(MRI)检查的妊娠晚期(36~40周)患者74例,其中有剖宫产史孕妇34例(剖宫产组),经阴道分娩史孕妇40例(对照组)。在MRI图像上分别测量2组孕妇子宫下段的厚度,采用线性回归模型分析孕妇的年龄、孕周、剖宫产史、剖宫产的次数、距上次剖宫产的间隔时间等因素对子宫下段厚度的影响。结果:剖宫产组孕妇子宫下段厚度为(3.34±0.71)mm,对照组孕妇子宫下段厚度为(3.97±1.08)mm,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。线性回归模型中,剖宫产史对子宫下段厚度的影响差异有统计学意义(P<0.05),孕妇的年龄、孕周、剖宫产的次数、距上次剖宫产的间隔时间对子宫下段厚度的影响差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:剖宫产史是影响妊娠晚期瘢痕子宫下段厚度的主要因素。
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823
肝素-泊洛沙姆超声微泡体外溶栓实验
王艳1,赵应征2,唐琴琴2
目的:探讨治疗性超声(US)介导结合肝素-泊洛沙姆(HP)的微泡(MB)对自制体外血栓的溶解作用及机制。方法:对兔耳缘静脉进行取血,制备体外血栓,通过考察不同栓龄、超声声强(净强度2~8 W/cm2)、作用时间和材料浓度下的栓溶率来确定各组的溶栓效应,并对其机制进行探讨。实验分组为:①US组;②US+MB组;③HP组;④US+HP组;⑤US+MB+HP组。结果:US+MB+HP组超声所需时间最短,溶栓效果最好,而其余各组对于体外血栓也有一定溶解作用。结论:新合成的材料HP与超声微泡联合应用后溶栓效果明显提高,其在临床治疗血栓性疾病中具有较好的应用潜力。
2015 Vol. 45 (11): 823- [
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827
神经内科记忆门诊认知障碍患者分布情况及治疗依从性随访观察
冯靓1,吴文秀2,谢莹3,王贞1,肖美娟1,何金彩1
目的:观察温州医科大学附属第一医院神经内科记忆门诊认知障碍患者的分布情况,了解影响患者治疗依从性的因素。方法:连续登记2012年11月-2013年1月间在温州医科大学附属第一医院神经内科记忆门诊就诊的认知障碍患者,确定病因分型和疾病严重程度分布。随访(56±7)d,统计随访者及失访者例数及影响因素,采用logistic回归分析影响治疗依从性的因素。结果:共筛查了93例记忆障碍患者,入组60例,其中阿尔茨海默病(AD)源性认知障碍40例,占66.67%;血管性认知障碍7例,额颞叶痴呆(FTD)2例,其他原因导致认知障碍11例。不同病情严重程度均占一定比率,其中轻度认知功能障碍11例,占18.33%;中重度痴呆患者合计34例,占56.67%。对8个可能影响依从性的因素进行分析发现,文化程度为独立相关因素(P=0.01,OR=2.3,95%CI:1.19~4.45)。结论:温州医科大学附属第一医院神经内科记忆门诊认知障碍患者的首位病因为AD源性认知障碍,中重度认知障碍患者所占比率高,患者的文化程度与治疗依从性独立相关。
2015 Vol. 45 (11): 827- [
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831
维持性血液透析患者睡眠障碍与脂肪细胞因子水平相关关系
张一帆,刘琦,邵国建,郑约楠,项巧群
目的:寻找维持性血液透析(MHD)患者中细胞因子水平与睡眠障碍间的潜在的关系,从而为血透患者睡眠障碍影响心血管疾病发生的机制探讨提供参考。方法:选择我院肾脏内科血液透析中心2013年1月-2014年8月透析时间超过3个月且病情比较稳定的MHD患者82例,根据匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)积分分为睡眠障碍组(PSQI>5,n=56)和对照组(PSQI≤5,n=26)。2组于血透前检测血尿素氮、血肌酐、血白蛋白、C反应蛋白(CRP)、瘦素、血白介素(IL)-6。对2组患者上述指标进行统计学分析。结果:2组患者性别和年龄差异均无统计学意义(P>0.05),但睡眠障碍组患者CRP、瘦素较对照组更高,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血液透析患者的睡眠障碍与脂肪细胞因子水平存在相关关系。
2015 Vol. 45 (11): 831- [
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834
儿童医院感染败血症病原菌及感染率10年变迁
叶小姣,娄鹏程,金江兵,梁亚峰,卢露,单小鸥
目的:调查儿童(非新生儿)医院感染败血症病原及预后、感染率情况,为临床防治提供科学依据。方法:对自2005年1月至2014年12月间我院68例医院感染败血症的临床资料进行回顾性调查分析。结果:我院10年儿童(非新生儿)医院感染败血症感染率为0.054%,2005-2010年总体感染率(为0.091%)较高,2010年之后感染率(为0.035%)明显下降,差异有统计学意义(x2=16.530,P=0.000)。共检出70株病原菌,其中革兰阳性菌35株(占50.0%),革兰阴性菌30株(占42.9%)、真菌5株(占7.1%)。居前3位的革兰阳性菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌、口腔链球菌、金黄色葡萄球菌。革兰阴性菌前4位依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和沙门杆菌。肠杆菌和肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌均存在多重耐药现象。结论:我院儿童(非新生儿)医院感染败血症2005年1月至2014年12月感染率为0.054%,2010年起感染率明显下降。病原菌构成以革兰阳性菌为主,构成比前后5年无明显差异。
2015 Vol. 45 (11): 834- [
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838
小儿卵巢囊肿40例临床分析
包小周1,秦乐1,邹双微2,林进汉1,陈肖鸣1,赵一鸣1
目的:分析小儿卵巢囊肿的诊断和治疗方法。方法:回顾性分析我院2012年1月至2014年12月间40例小儿卵巢囊肿患儿的临床资料。结果:发病年龄26 d~14岁,平均9岁。左侧卵巢囊肿22例,右侧17例,两侧1例。38例行手术治疗,其中20例行腹腔镜手术,18例行传统开腹手术。1例非手术治疗因住院期间囊肿自行消失,另1例因囊肿小且无症状行保守治疗。6例卵巢囊肿蒂扭转致卵巢坏死行附件切除术,1例快速病理报告为无性细胞瘤,行附件切除术。31例行卵巢囊肿剥除术。病理报告为囊性成熟性畸胎瘤、浆液性囊腺瘤、黏液性囊腺瘤、混和性囊腺瘤、内膜样囊肿等。结论:儿童卵巢囊肿的临床症状少有特异性,其确诊及鉴别诊断依赖于影像学检查,β-hCG检测对评估囊肿良恶性有较大意义;卵巢囊肿蒂扭转后卵巢能否保留取决于早期诊断、及时手术和肿瘤性质。腹腔镜手术治疗良性卵巢囊肿有其优势,但对于恶性者应谨慎选择术式。
2015 Vol. 45 (11): 838- [
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842
马蹬型气动腿架在直肠癌根治术中的应用
施若霖1,林卫红1,熊响清2,宋华羽3,倪士昌3,左志贵3
目的:观察马蹬型气动腿架在直肠癌根治术中的应用效果。方法:选择连续硬膜外加全麻下行直肠癌根治术的患者106例,随机单盲法分为2组:对照组为传统截石位组,托腿板关节端置于腘窝处。试验组为改良截石位,即用马蹬型气动腿架摆放,将其单纯支托小腿,小腿近水平位。比较2组体位摆放所需时间、医师满意度及术后相关并发症的发生率。结果:试验组截石位摆放时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);医师满意率对照组为66.0%,试验组为98.1%,差异有统计学意义(P<0.05);对照组有3例发生下肢深静脉血栓形,4例下肢肿胀,试验组无相关并发症发生,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:马蹬型气动腿架可缩短体位摆放时间,提高医师手术的满意度,减少术后并发症的发生。
2015 Vol. 45 (11): 842- [
摘要
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技术与方法
845
迭代算法对CT低剂量扫描潜能的体模研究
缪妙1,曹国全2,邰云鹏2,曾碧新3
目的:研究在保证图像质量的前提下,自适应迭代降剂量算法(AIDR 3D)降低CT扫描剂量的潜能。方法:采用320层CT容积扫描模式,用不同管电流(50、80、150、250、350、450、550 mA)扫描体模Catphan500的低对比度模块CTP515和高分辨率模块CTP528,并用滤过反投影重建算法(FBP)与AIDR 3D的三个迭代等级(mild/standard/strong)分别重建图像,对比分析图像的噪声、对比噪声比、信噪比以及空间分辨率等图像质量参数。结果:采用AIDR 3D重建可以显著降低图像噪声,提高对比噪声比和信噪比,同时不改变空间分辨率。最高降低辐射比例达78.41%。结论:AIDR 3D迭代算法具有良好的降低CT扫描剂量的能力。不同的迭代等级降低剂量的潜能不同。
2015 Vol. 45 (11): 845- [
摘要
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综述
849
我国剖宫产现状及思考
林虎
本文检索国内外相关资料,对中国近十几年来的剖宫产及无医学指征剖宫产急剧、持续上升的原因,影响因素进行了剖析。我国近年来的剖宫产率居高不下,主要原因为无医学指征剖宫产数量增加。我国在以头盆不称、产程异常及胎儿窘迫为指征的剖宫产中也存在过度诊断的现象。因此,实施剖宫产术要有充分手术指征,这是降低剖宫产率的关键。
2015 Vol. 45 (11): 849- [
摘要
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个案报告
854
急性胰腺炎并发脑梗死1例
夏誉1,叶素贞2,何金彩3
2015 Vol. 45 (11): 854- [
摘要
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高教研究
856
微信视角下大学生先进典型激励教育模式研究#br#
金伟琼
微信已经成为当前高校大学生群体必不可少的沟通交流工具。大学生的先进典型教育可以充分发挥微信传播的生活性、即时性、互动性等特点,在传播学理论的基础上,进行先进典型人物传播的意见领袖培养,有计划有目的地开展先进典型事迹的宣传,利用微信平台,实现先进典型人物与受众群体的有效互动,进而起到激励教育作用。
2015 Vol. 45 (11): 856- [
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