重组质粒转染293细胞及表达
叶小姣,黄琼芳
温州医学院附属育英儿童医院 儿童重症监护病区,浙江 温州,325027 温州医学院附属第一医院血液科,浙江温州,325000
Expression of recombinant eukaryotic vector in 293 cell
YE Xiaojiao,HUANG Qiongfang
引用本文:
叶小姣,黄琼芳. 重组质粒转染293细胞及表达[J]. 温州医科大学学报, 2013, 43(5): 304-306，310.
Cite this article:
YE Xiaojiao,HUANG Qiongfang. Expression of recombinant eukaryotic vector in 293 cell[J]. JOURNAL OF WEZHOU MEDICAL UNIVERSITY, 2013, 43(5): 304-306，310.
摘要 目的:探究通过脂质体转染技术介导重组质粒pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP转染293细胞的方法.方法:采用Lipofectamine 2000方法将包含目的基因pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP的质粒转染293细胞.在转染24 h后于荧光显微镜下观察红色荧光出现情况.收集并浓缩稳定转染后293细胞的上清液,提取细胞膜蛋白和胞浆蛋白,采用Western b1ot方式判断转染细胞是否表达目的蛋白.结果:①荧光显微镜下可观察到红色荧光蛋白(RFP)发出红色荧光.②Western b1ot鉴定结果:提取稳定转染的293细胞胞浆蛋白Western b1ot鉴定可见到大小为62 kD左右的条带.浓缩的上清蛋白与提取的胞膜蛋白Western b1ot鉴定未见到目的蛋白表达.结论:应用脂质体转染技术,成功介导目的基因pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP转染到293细胞中,为进一步研究重组CD13单链抗体对血液肿瘤的靶向杀伤作用打下了实验基础。
Key words ：
CD13
antibody targeted therapy
plasmid
[1]
. 目录封面封底
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