S100P基因慢病毒表达载体的构建及对结肠癌Caco-2细胞的影响
王福乐，林飞燕，吴建波，蒋磊
温州医学院附属第一医院 内科实验室,浙江 温州,325000
Construction of S100P lentiviral expression vector and effect on colon cancer Caco-2 cells
WANG Fule,LIN Feiyan,WU Jianbo,JIANG Lei
引用本文:
王福乐,林飞燕,吴建波,等. S100P基因慢病毒表达载体的构建及对结肠癌Caco-2细胞的影响[J]. 温州医科大学学报, 2013, 43(1): 5-8.
Cite this article:
WANG Fule,LIN Feiyan,WU Jianbo, et al. Construction of S100P lentiviral expression vector and effect on colon cancer Caco-2 cells[J]. JOURNAL OF WEZHOU MEDICAL UNIVERSITY, 2013, 43(1): 5-8.
摘要 目的:通过构建S100P慢病毒表达载体,研究其对结肠癌Caco-2细胞的影响.方法:以DLD-1细胞cDNA为模版,PCR扩增S100P基因序列,然后将该序列克隆插入慢病毒载体中,构建S100P慢病毒表达载体,包装产生慢病毒颗粒.将慢病毒颗粒感染Caco-2细胞,荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白表达；应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)技术检测S100P的表达情况;MTT法检测细胞生长变化；细胞平板克隆培养检测其细胞克隆形成能力.结果:构建的慢病毒表达载体Lenti-S100P经酶切和测序鉴定结果正确；携带S100P基因的慢病毒颗粒感染Caco-2后,细胞中S100P基因和蛋白过表达,促进细胞克隆形成能力.结论:本研究成功构建S100P慢病毒表达载体,为深入研究S100P基因的相关功能提供了一定的实验基础。
基金资助: 国家自然科学基金青年基金 浙江省自然科学基金资助项目 浙江省钱江人才计划资助项目 温州市科技计划项目
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